Могу ли ПЦР грешке? Лажни негативни и лажни позитивни резултати ПЦР

Симптоми

Да би добили лажне резултате у ПЦР-дијагнози - и лажно позитивно и лажно негативно - могу утицати различите околности.

Употреба методе полимеразне ланчане реакције (ПЦР) захтева најстроже поштовање свих фаза анализе, почевши од анализе анализе од стране лекара до тумачења резултата анализе. Како информативна ПЦР анализа зависи од многих околности.

  • Лажан позитиван резултат анализе може бити резултат уласка у материјал (мазање или гребање уретре) крви.
  • Слични лажни позитивни резултати ПЦР анализе добијени су због одсуства епителних ћелија у материјалу, али садржаја велике количине потпуно неинформативне слузи.
  • На пријем резултата лажних анализа ДНК утиче неправилан транспорт и чување добијених узорака. ДНК инфекција у овом случају може бити уништена и као посљедица - лажно негативан резултат.
  • Поремећаји стерилитета током ПЦР дијагностике су још један разлог за лажно позитиван ПЦР. У сакупљеном материјалу пацијента, иностране бактерије могу ући из руку доктора, од одјеће, од стакла или контаминираног алата, до уређаја за поновно кориштење. Као резултат, пронађена је "непостојећа" инфекција.
  • Неадекватни реагенси. Неограничена и застарела лабораторија у којој лекари "затварају очи" о непостојању реагенса је још један и озбиљан разлог за непоуздану дијагнозу. Наравно, ово знатно смањује трошкове лабораторијске дијагностике, али не може утицати на њене резултате.

У настојању да се избегне такве грешке, лекари у Медицинском центру "Евромедпрестизх" веома озбиљан приступ вођењу лабораторијске дијагностике: користити само за једнократну употребу материјала у свим фазама анализе, у складу са потребним мерама за одржавање комплетне стерилитет лабораторије и канцеларије лекара. Ми запошљавају само лекаре највише категорије и искусних техничара, који редовно унапреде своје вештине, да се не третирају непостојеће болести, као и да добију поуздане резултате.

Лажно позитиван резултат ПЦР

Наше предности:

  • Повољно примање лекара од 900 рубаља
  • Хитно Анализе на дан лечења од 20 минута до 1 дана
  • Затвори 5 минута од станице метроа Варсхавскаиа и Цхистие Пруди
  • Погодно радимо сваки дан од 9 до 21 сваки дан (укључујући и празнике)
  • Анонимно!

Полимеразна ланчана реакција је можда једна од најосетљивијих и најтачнијих метода дијагностиковања различитих заразних болести, посебно оних које се сексуално преносе. Одређивање чак и мале количине ДНК честица бактерија, вируса, гљивица, ПЦР је прилично специфична метода која ретко даје лажне позитивне резултате.

Лажно позитивни резултат значи да заправо нема инфекције, а реакција је позитивна.

Али, чак и са 98-99% тачности, понекад ПЦР има и нетачне одговоре који скоро никада нису повезани са самим одговором, већ више за кршења у прелиминарној фази.

Разлози лажног позитивног резултата ПЦР анализе су:

  • Временски рок за спровођење контролних тестова након лечења сексуалних инфекција није одржан. Чињеница је да је већина инфекција унутар ћелија или фиксирана на површини њихових мембрана. Током потпуног третмана, узрочник СТИ пропада, али честице његовог генома (ДНК) остају неко време у организму домаћина. Потребно је време, око 3 недеље, да се ове ћелије замене новим онима који нису контактирали заразни агенс, а онда се контролише. Ако узмемо анализу пре, због високе осетљивости ПЦР детекцију ДНК већ мртве бактерије и указује на присуство патогена, која ће бити лажно позитиван, јер је инфекција већ умро.
    Наши лекари имају довољно знања из области дијагнозе СТД и старења, па су такве ситуације у приватној пракси клинике искључене.
  • ДНК полно преносивих инфекција улази у епрувету из руку венереолога, од рукавица и уролошких сонди.
    Овај фактор је искључен, јер се за узимање материјала користе само рукавице за једнократну употребу, епрувете и сонде.
  • Изузетно је ретко имати лажне позитивне резултате уколико је у узгоју повезано микроорганизам. То значи да анализатор даје присутност патогене бактерије која узрокује венеричку болест, али у ствари она је компонента нормалне микрофлоре. Али овај проблем је дуго решен увођењем модерних и специфичних тест система.
  • Контаминација или увођење ДНК инфекције у епрувету у лабораторијској фази студије била је могућа, али је практично искључена исправном организацијом дијагностичког процеса и обуком особља.

У сваком случају, дијагноза се увек прави не само на основу резултата једне анализе. Коначна дијагноза сексуално преносиве болести је комбинација жалби, клиничког прегледа и комбинације различитих лабораторијских и инструменталних метода.

Ако је уролог, гинеколог или венеролог појављују сумњу у исправност резултата ПЦР је открила неслагање или постојећих клиничких и лабораторијских дијагностичких података са међусобно, доктор увек препоручујемо даља испитивања коришћењем ЕЛИСА методе, НАСБА, усеви, како би се разјасни ситуацију.

У нашим клиникама постоје све расположиве методе модерне медицине за испитивање мушкараца и жена. Због тога је искључено успостављање лажних дијагноза СПИ.

Доктор клинике "Приватна пракса" дерматовенереолог, уролог Волокхов ЕА говори о анализи ПЦР-а за инфекцију.

Медицински центар на Цхистиие Пруди и Варсхавка

Пријем у наше клинике дневно од 9.00 до 21.00

У САД и СВАД - метро Варсхавскаиа, Какховскаиа, Севастопол - ст. Болотниковскаиа хоусе 5 буилдинг 2, тел. 8-499-317-29-72

У центру (ЦАО) - метро Цхистие Пруди, Тургеневскаиа, Лубианка - Кривоколенни пруга 10 страна 9, тел. 8-495-980-13-16

Ваша питања

Питање: Колико је тачна ПЦР дијагноза?

Која је тачност ПЦР дијагностике?


Тачност ПЦР (полимеразна ланчана реакција) дијагноза у одређеним инфекцијама креће се од 99 до 100 процената.
Изузетно је ретка ПЦР даје лажно негативне резултате и, у пракси, не производи лажне позитивне резултате. Лажно негативан резултат је када анализа показује одсуство патогеног микроорганизма (извор инфекције), онда када је заправо то.
Ово се може десити када:

  • Биолошки материјал није правилно изабран. На пример, када инфекција цитомегаловируса испитује урину (не мрље из грла или крви) или дијагностика инфекција централног нервног система (централни нервни систем) уместо цереброспиналне течности, користи се крв.
  • Правила за сакупљање биоматеријала нису поштована. Ако је особа прошла антибиотску терапију током ПЦР тестова, узима уросептике и антивирусне лекове. Такође, лажно-негативни тестови могу бити, ако пре испоруке мокраће или урин пацијент мокрен, има секс на вечеру или узима лекове у облику вагиналних супозиторијасвеће).
  • Испитује се извор инфекције, који у току своје виталне активности подлеже променама. У срцу било ког микроорганизма је способност промјене. Неки вируси могу створити варијабилност на нивоу ДНК (деоксирибонуклеинска киселина). На пример, вирус инфлуенце има велику способност да "мутира" и промени своје генетске информације. Према томе, ПЦР не може открити извор инфекције, пошто је геном (агрегат гена) су подложне промјенама.

Лажно позитиван резултат (анализа показује присуство инфекције када није присутна) није типичан за ПЦР дијагностику и налази се само у оним случајевима када је инфекција већ "мртва", али њене мртве ћелије циркулишу у телу. Немогућност разлике између "мртве" инфекције и активне (живахно) инфекција је једна од недостатака ПЦР методе. У случају да особа већ има одређену инфекцију (болест је третирана и убијена антибактеријским или антивирусним агенсима), ПЦР анализа ће и даље дати позитиван резултат патогеном микроорганизму, чак и ако је већ "мртав".

Када је могуће лажно позитивно тестирање за сифилис

Анализа за дефиницију сифилиса је неопходна да особа преузима готово све: запошљавање, лекарски преглед, превентивни прегледи, трудноћа. Имплементација ових студија је неопходна - омогућавају идентификацију болести у раним фазама, када ће третман имати највећу ефикасност.

Позитивни резултат који се добија често доводи особу у слепи крај, нарочито у одсуству било каквих разлога. Детекција лажног позитивног сифилиса је прилично честа појава, па зато не паничите рано. Према информацијама из различитих извора, до 30% примарних студија може произвести погрешан резултат. Постоји много разлога за овај феномен: промена стања тела, соматских болести. Да би боље разумели зашто се појављују, вреди пажљивије разумјети питање истраживања.

Врсте тестова за сифилис

Методе клиничког истраживања се брзо побољшавају сваке године. Са развојем нових метода дијагнозе, лажна позитивна реакција на сифилис је све мање уобичајена. Ако је потребно, дијагноза може укључити неколико различитих метода - то вам омогућава да добијете најпоузданији резултат.

Не-трепонемалне методе истраживања

Ове технике имају за циљ идентификацију протеина који се формирају као резултат активности бледих спирохита. Они имају за циљ одређивање "трагова" патогена. Такве методе имају релативно висок проценат грешке (до 10%). Такве технике нису неспецифичне, али дозвољавају титру антитела да одреде степен инфекције.

Вассерманн реакција РВ

Најчешћа анализа, која се спроводи ради идентификације бледог трепонема, је серолошки преглед крви. Реакција Вассермана омогућава нам да утврдимо присуство болести за само неколико минута. Због тога се ова техника најчешће користи у лабораторијама - не захтева пуно времена и има релативно ниску цену.

Спинална течност или крв се користи за извођење анализе. Материјал за узорковање се може узети с прста (ако се само један анализира) или из вене (ако је потребно неколико студија). Као резултат анализе може бити не само лажно позитивно, већ и лажно негативно. Могуће је у следећим околностима:

  • рана фаза инфекције, када је количина трепонема у телу и даље ниска;
  • хронична болест у фази ремисије, када се број антитела смањује.

Обрати пажњу! Лажно негативан резултат произлази изузетно ретко, и стога, ако постоји бар један плус од четири, потребно је додатно испитати.

Микрокретирање рециклаже (МР)

Овај метод испитивања базиран је на реакцији антиген-антитела. За то је потребна мала количина материјала. Његов циљ је откривање антилипидних антитела, које се производе у процесу уништавања ћелија помоћу трепонема. За студију користе се и пацијентова крв и цереброспинална течност.

Пошто се уништење ћелија може јавити не само с сифилисом, анализа се користи као скрининг, а не потврда. Постоје два аналога ове технике:

  • Микроскопски тест (ВДРЛ). Да би се извршила анализа, користи се инактивирани серум у крви. Ако постоји сумња на лезију нервног система с сифилисом, кичмени флуид се користи као тестни материјал.
  • Макроскопски тест (РПР). Сматра се методом експресне дијагностике. Користи се визуелни прорачун плазма реактаната.

Ова реакција, уколико се не примећује неопходна стерилност, може показати лажно позитиван резултат. Појава такве анализе је такође могућа код неспецифичног оштећења ткива, што подразумијева уништавање липида. Ако постоји позитиван резултат, препоручује се обавезни трепонемални тест за потврду.

Трепонемалне методе истраживања

Ова категорија анализа даје најтачније податке и ретко су лажно позитивни резултати. Студије су усмерене на идентификацију специфичних протеина које тело ослобађа као одговор на инфекцију. Ове методе имају већи трошак и стога се користе као потврде, а не квалификације.

Специфична антитела почињу да производе тело само неколико недеља након инфекције трепонемом. Они могу трајати дужи период да би излечили болест. Стога, специфични тестови могу показати позитивне резултате дуго након ремисије.

Обрати пажњу! Са позитивним РВ и негативним специфичним, поново се спроводи студија након неколико недеља.

Имуноензимска анализа (ЕЛИСА, ЕИА)

Базира се на процени нивоа ИгА, ИгБ и ИгМ имуноглобулина. Прве две врсте протеина производе се у телу од 2 недеље инфекције, а ИгМ - месец дана након инфекције.

Интерпретација анализе врши се на основу односа присуства имуноглобулина:

  • Откривено је само ИгА - није протекло више од 14 дана од инфекције;
  • ИгА и ИгБ инфекције су откривени пре 14 до 28 дана;
  • пронашли су све три врсте - сифилис у телу више од 28 дана;
  • Откривен је само ИгМ - касни сифилис.

Присуство ИгМ може бити знак већ оздрављеног сифилиса - синтеза имуноглобулина ИгМ може се наставити неколико мјесеци након ремисије.

Реакција имунофлуоресценције (РИФ, ФТА)

Користи се за потврђивање инфекције у најранијим фазама. За испитивање, крв се узима са прста или вене. Резултат је сличан анализи РВ, где је назначен минус или од 1 до 4 плуса. Ако постоји бар један плус, може се додијелити додатна студија.

Изузетно ретко је пронаћи лажне позитивне резултате приликом извођења РИФ-а - они могу бити код трудница, као и код пацијената са болестима везивног ткива.

Реакција пасивне аглутинације (ТПХА, ТПХА)

Титар антитела омогућава утврђивање присуства сифилиса и његове фазе. Поуздани подаци ова техника даје већ од 28 дана након инфекције. За евалуацију користи се крв с прста или вене. Повећање броја антитела значи каснију фазу болести.

Најтачнији истраживачки методи

Анализе ове групе су веома осетљиве и због тога је грешка у њиховим резултатима изузетно ниска. Оне се разликују по вишој цени, у поређењу са другим методама и са софистициранијом техником имплементације.

Полимеразна ланчана реакција (ПЦР)

ПЦР анализа се сматра једним од најтачнијих. Циљ је одређивање подручја патогене ДНК у људском телу. Метода захтева специјализовану опрему и реагенсе, и стога се користи у ретким случајевима.

Имуноблоттинг

Комбиновани метод истраживања. Циљ је одређивање имуноглобулина у серуму пацијента. У анализи се проверава присуство комплекса антитела, према коме се утврђује дијагноза. У овој технику се користи електрофореза, са којом се одвајају имунодерминанти и ЕЛИСА тест који показује одвојене тачке.

Реакција имобилизације бледо трепонеме (РИБТ)

Високо специфична анализа која одређује реакцију крвног серума према бледој трепонемији. Он се широко примењује широм света, јер има велику вероватноћу тачног резултата. Специјална антитела (имуномобилизини) код пацијената са сифилисом могу да имобилизују трепонем. У крви здравог човека нема таквих антитела. На присуству / одсуству ове способности заснована је методологија истраживања.

РИБТ се користи да идентификује оне сорте сифилиса у којима Вассерман реакција производи негативне резултате - пораз нервног система, унутрашњих органа, латентног облика болести. Лажно позитивни резултат у земљама ЗНД-а је изузетно ретко. Узрок његовог појављивања може бити саркоидоза, лезија.

Узроци лажних позитивних резултата

Вассерманова реакција може одредити лажне позитивне резултате "акутних" и "хроничних". Његова тежина зависи од природе промена у људском стању. Фаза угрожености РВ може се приказати у таквим случајевима:

  • инфективне болести у фази погоршања;
  • трауматске повреде;
  • инфаркт миокарда;
  • увођење било које вакцине неколико дана пре испитивања;
  • тровање храном.

Ове услове карактерише повећани рад имуног система, што доводи до повећања производње антитела. Они се погрешно препознају у реакцији као антитела на трепонему, а самим тим и позитиван резултат.

У присуству патологије хроничне природе, имуни систем производи велики број неспецифичних антитела која могу изазвати реакцију. У РВ, ово стање може показати лажно позитиван резултат. Стога је вредно упозорити доктора о следећим болестима:

  • хронична патологија везивног ткива;
  • туберкулоза;
  • хроничне болести вирусне етиологије: ХИВ, хепатитис Б, Ц, Д;
  • хронична обољења јетре;
  • аутоимуне патологије.

Са старосном доби у телу пацијента, редокс реакције успоравају. Ткива старења такође могу показати лажно позитиван резултат, па стога старијим пацијентима добијају прецизније методе истраживања.

Обрати пажњу! Уз позитивну Вассерман реакцију, спроведена је додатна студија, што омогућава да се добије тачнија слика.

Прегледајте поново

Поновљени тест за сифилис се изводи са упитним резултатима испитивања. Именује се са једним или два крста - ова анализа захтева додатну проверу. Студија може дати лажне позитивне резултате у неколико случајева:

  • Рана фаза болести. Пре појављивања чврстог шанкера, количина имуноглобулина у телу је довољно ниска.
  • Касно стање болести. Од инфекције прошло је више од 2 године, а титар антитела је постепено почео да опада.

Поновљена анализа, која се спроводи након 2-3 недеље, показује тачно да ли постоји болест. Ако постоји други резултат, други пут се користе додатне технике разјашњавања.

Тестови трудноће

Један од најочекиванијих може бити позитиван резултат за сифилис код трудница, нарочито ако жена није променила партнера. Ова ситуација често застрашују будуће мајке, јер трепонема може негативно утицати на интраутерини развој бебе.

Скрининг за трудноћу се врши неколико пута:

  • када се региструје, у 12 недеља;
  • почетак 3. тромесечја, по 30 недеља;
  • пре рођења.

Ово је количина истраживања која се сматра минималним. Лажна позитивна анализа за сифилис може се манифестовати услед реструктурирања тела који се јавља током трудноће. Када жена носи дете, њен имуни систем производи велики број антитела - еволуциони уређај који штити бебу у првој години живота.

У току трудноће је предвиђена додатна анализа рафинације, која се одликују већом тачношћу. Ако контролна студија показује присуство неког агенса у телу, третман је обавезан. Ефекат терапије на растући организам је знатно мањи од могуће штете од трепонема.

Како се припремити за анализу?

Један од начина да се спречи погрешан резултат је припрема за испоруку тестова. Због неправилне припреме може доћи до реакција које праћено производњом неспецифичних антитела, што доводи до појаве погрешног резултата.

  • Анализа се мора одвијати на празан желудац. Можете користити само чисту воду.
  • Дан пре узорковања крви потребно је потпуно елиминисати алкохол - то ствара додатно оптерећење на јетру, што може довести до појаве позитивног резултата.
  • Препоручује се уочи одбијања јести масне и пржене хране, зачињене јела и велики број зачина.
  • Најмање 60 минута пре анализе препоручује се да се уздржи од пушења.
  • Пре него што узмете крв из вене, потребно је да се одморите 10-15 минута на одељењу за пријем.
  • Женама се не препоручује да донирају крв током менструације.
  • Немогуће је извршити анализу након рентгенског прегледа, физиотерапијских процедура.
  • Забрањено је донирање крви за сифилис током погоршавања заразних болести.

Обрати пажњу! Ако пацијент узима лекове, требало би да се консултује са лекаром пре теста, можда ће бити потребно неколико дана од узимања лекова и анализе.

Шта да радим ако имам сифилис?

Не брините за добијање примарног скрининга са позитивним резултатима. Лажни сифилис се лако одређује поновљеним испитивањем. Ако је дијагноза потврђена, потребно је предузети мјере:

  • испитивање сексуалног партнера код дерматовенеролога;
  • испитивање блиских рођака;
  • спровођење превентивног третмана, спречавање заразе сродницима;
  • регистрација боловања због периода лечења - лист боловања не садржи информације о дијагнози, гарантујући поверљивост;
  • на крају курса издаје се посебан сертификат - потребно је да имате са собом да избегнете питања о лажним позитивним резултатима у наредних неколико месеци.

Позитиван резултат за сифилис није увијек поуздан. Стога, не брините и препоручујемо вам да сачекате додатна истраживања. Одговарајући третман, који је започео на време, гарантује брз опоравак са минималним резидуалним ефектима.

Могу ли ПЦР грешке? Лажни негативни и лажни позитивни резултати ПЦР

Поделите нове информације у:

Да прими лажни резултати у ПЦР дијагностици - Лажно позитивно и лажно негативно - може утицати на различите околности.

Употреба методе полимеразне ланчане реакције (ПЦР) захтијева најстроже поштовање свих фазе анализе, почевши од анализе узоракадоктор пре тумачења резултата анализе. Како информативна ПЦР анализа зависи од многих околности.

  • Лажно позитивни резултат анализе може бити резултат уласка у материјал (мазање или гребање уретре) крв.
  • Слични лажни позитивни резултати ПЦР анализе добијени су због одсуства епителних ћелија у материјалу, али садржаја велике количине потпуно неинформативне слузи.
  • На пријем резултата лажних анализа ДНК утиче неправилан транспорт и чување добијених узорака. ДНК инфекција у овом случају може бити уништена и као посљедица - лажно негативан резултат.
  • Поремећаји стерилитета током ПЦР дијагностике су још један разлог за лажно позитиван ПЦР. У сакупљеном материјалу пацијента, иностране бактерије могу ући из руку доктора, од одјеће, од стакла или контаминираног алата, до уређаја за поновно кориштење. Као резултат, пронађена је "непостојећа" инфекција.
  • Неадекватни реагенси. Неограничена и застарела лабораторија у којој лекари "затварају очи" о непостојању реагенса је још један и озбиљан разлог за непоуздану дијагнозу. Наравно, ово је врло јефтино лабораторијска дијагностика, али не може утицати на њене резултате.

Делите нове информације са пријатељима и познаницима у:

Шта је боље и ефикасније у лабораторијској дијагностици - ПЦР или ЕЛИСА анализа?

ПЦР и ЕЛИСА су две дијагностичке методе које су стекле признање међу медицинским професионалцима. Обе студије молекуларне биохемије су тачне и поуздане. Постоји разлика између ПЦР или ЕЛИСА, шта је боље и истинито о патологији? Да би одговорили на питање, неопходно је разумети суштину технике, идентификовати сличности и разлике у дијагностичким методама.

Шта је ПЦР?

ПЦР је високо осетљива полимеразна ланчана реакција која ће открити патогене (вирусе, бактерије, кламидију) у организму. Ова техника се заснива на одређивању специфичне структуре ДНК присутне у инфекцији. ПЦР се изводи ако постоји сумња на латентни хронични ток инфективног процеса у организму који је у латентном облику. Карактеристике и предности ПЦР-а укључују:

  • висока 100% осетљивост на патогене било које врсте уз присуство јединствених фрагмената нуклеинских киселина;
  • брзина резултата;
  • могућност утврђивања броја једне врсте патогена;
  • истовремена дијагноза неколико патогена.

Лаборатори без тешкоћа коришћењем ланчане реакције полимеразе једним патогеном ДНК одређује структуру омогућавајући мониторинг и евалуацију резултата лечења након примене терапије лековима. ПЦР, као нова истраживачка метода, неопходан је за дијагностиковање таквих болести:

  • туберкулоза;
  • дифтерија;
  • салмонелоза;
  • ХИВ;
  • АИДС;
  • хепатитис Ц независна фаза;
  • бактериоза.

Шта је ЕИА?

ЕЛИСА је имунски метод истраживања и тачна анализа за идентификацију патологија у телу узрокованих инфективним агенсима. Студија се именује ако сумњате:

  • сифилис;
  • хепатитис Б, Ц;
  • хламидија;
  • токсоплазмоза;
  • цитомегаловирус;
  • вирусни херпес;
  • уреаплазмоза;
  • женска микоплазмоза.

Имунофер вам омогућава да у раној фази идентификујете онкологију. ЕЛИСА је прописана за детекцију нивоа хормона у крви, како би се дијагностиковале болести ендокриног система откривањем рака маркера. Имуноензимски преглед има многе предности:

  • Једноставност и брзина извођења;
  • висока осетљивост на реакције антигена-антитела чак и на позадини непомичне концентрације патогена у телу;
  • Хигх анализа специфичности, што омогућава да брзо открије и инсталира комплекса антиген-антитело нивоу, употребљени ензим ће обележавање способна тачно фик интеракцију сигнала између два, да препозна имуноглобулине (антитела ИгМ, ИгГ) у крви.

У случају инфекције организма у почетној фази доминира класи имуноглобулина из М. Према напредовања инфекције спојених антитела класе А. Ако је болест у поодмаклој фази прекидача, почиње стварање класе имуноглобулина имуноглобулина Г. ензимске реакционе ће открити степен озбиљности болести и фазу развоја болести.

Зар се ИФА разликује од ПТСР-а?

Испитивања ПЦР и имуноферменталне (ЕЛИСА) су подједнако у потрази за дијагностичким сврхама. Обе студије имају предности и слабости, сличности и разлике.

  1. ЕИА. Главни правац је откривање производа виталне активности маркерских протеина или успостављање контаката између патогена и имуног система. Одбијање или потврда чињенице инфекције у органима. Разлика између ЕЛИСА и ПЦР-а је погодност било којег биоматеријала за анализу: узорак ткива, пљувачка, урин, крв.
  2. ПЦР омогућава идентификацију специфичног патогена који припада групи гљивица, вируса, бактерија. Полимеразни метод дијагнозе открива патогени организам у материјалу: течност, ткиво, орган. Да би добили слику великог обима патолошких процеса који се јављају унутар тела, лекари одмах додељују 2 врсте анализа комплексу. Ово је важно за идентификацију ЗПППА (патологије које се преносе током сексуалног односа).

Прецизно утврђивање заразне болести, сексуалног преноса и нивоа антитела у крви, прво спроведено помоћу ПЦР-а, јер су резултати ЕЛИСА студије неразумни да се узму као основа без добијања примарних података.

Приликом откривања антитела у телу, један ИФА не може се недвосмислено рећи: да ли се патолошки процес одвија у тијелу или не. Вероватно су били контакти са патогеном, али далеко у прошлости, а анализа може дати лажни резултат.

Немогуће је донијети недвосмислене закључке о ПЦР-у или ЕЛИСА-у, а оно што је заправо поуздано. ЕЛИСА је ефикасан метод дијагнозе, али вероватноћа развоја болести може потврдити само ПЦР, па је разумно обоје заједно водити обе студије. ПЦР је прецизнији метод испитивања, али у узорку ткивног материјала и на посебном делу тела. Упркос прецизности технике грешке, често се дешава, јер се инфективни процес може брзо ширити по целом телу.

Разлика између истраживања

Пратите напредак, на пример: хламидија кроз цервикални канал, тешко је. Инфекција може бити одсутна у јајницима и јајоводним тубама када ЕЛИСА тест даје позитиван одговор, а тест ПЦР је негативан. То се догађа у супротном смеру. Да би добили 100% резултата, оба теста за ПЦР и ЕЛИСА су боље спроведена заједно.

Чини се да се резултати ПЦР или ЕЛИСА анализе не поклапају, што се дешава када се хронична инфекција пролонгира или ако се тело навикне на свој утицај. У овом случају ЕЛИСА је негативан, а ПЦР је позитиван. Ако у млазу има неколико микроба, али се антитела формирају и титри остају у крви дуже, чак и након третмана, ЕЛИСА ће бити позитивна и ПЦР негативан.

Често, методе дају лажно позитивне непоуздане одговоре када, на примјер: ЕЛИСА позитиван, ПЦР позитиван. Узимају се у обзир симптоми пацијента, без обзира да ли су лечени због инфекција. У ствари се дешава да је ПТСР негативан и ИФА је негативан.

Различити клинички случајеви захтевају индивидуални приступ. Стога, која је анализа боље за спровођење, а то је тачније: ПТСР или ИФА - одлуку доноси лекар који присуствује.

Проверите скривене сексуалне инфекције и препоручите се са партнером. На крају крајева, дешава се да је један од њих јасно изразио ток запаљеног процеса, док други нема сумње да негативно утиче на сексуални живот и изазива неповерење. Увек је боље да се консултујете са доктором и да их оба партнера поступа како би повећали ефикасност терапије и скратили период терапије.

На пример: са уреаплазмозом и микоплазмозом, добри резултати из лечења запаљенских процеса у карличићу могу се добити само у случају заједничког лечења.

Узимајући у обзир специфичности, може се закључити да ПЦР дијагностика и ЕЛИСА имају разлику, али оба метода могу поуздано утврдити присуство патологије. Међутим, само стручњаци могу да идентификују разлику између метода, изаберу стварне и исправне методе за дијагнозу, прецизније дају транскрипт резултата анализе.

Више о ПЦР методи можете сазнати из видео снимка:

Типичне грешке у дијагнози ланчане реакције полимеразе

Лабораторијска дијагностика на бази полимеразне ланчане реакције (ПЦР), захваљујући својој брзини и високој осетљивости, све више се развија. Међутим, упркос једноставности и погодности методе, постоји низ услова, чији неуспех може довести до непоузданог или лажног резултата.

Једноставан на први поглед, метода има низ "замка", који се морају решавати готово сваком лабораторијском специјалисту. Различите грешке могу утицати и на недостатак искуства у коришћењу ове технике, иу стереотипима размишљања кадрова који су претходно радили у биокемијским или бактериолошким лабораторијама, гдје су други захтјеви за рад. Као резултат таквих грешака, могу се добити лажно-позитивни, лажно-негативни или непоуздани резултати тестова.

Све грешке дозвољене у лабораторијској пракси могу се поделити у три класе:

  • преаналитичке степене грешке;
  • грешке аналитичке фазе;
  • грешке постаналитичког стадијума.

Грешке преаналитичке фазе ПЦР-дијагностике

Узимање биолошког материјала.

Цхламидиа трацхоматис може инфицирати слузокоже епител урогениталног тракта, коњуктивно епител ока и синовијској шупљине. Због тога, у случају сумње урогениталног цхламидиосис материјала за истраживање треба да послужи као стругање урогениталног тракта, очне болести новорођенчета - стругање коњунктиву, са хламидијом артритиса - ПУНКТАТА синовијској течности.

Мицобацтриум туберцулосис може утицати на готово било који орган и ткиво људског тела, тј. Материјал за истраживање не треба спалити истим у различитим облицима патолошког процеса.

Тако, ако је око дете на хламидију, и за испитивања узорка узетог из урогениталног тракта и бубрега за истраживање туберкулозе узима испљувак негативан резултат не искључује чињеницу да је инфекција пацијента.

Друга грешка у преаналитичкој фази је погрешно узимање материјала за студију.

Општи захтеви за биолошки материјал су максимална концентрација микроорганизама у узорку, као и одсуство нежељених нечистоћа које инхибирају ПЦР.

На пример, Цхламидиа трацхоматис - обавезно интрацелуларни паразити, па тест материјал треба да садржи велики број епителних ћелија [4]. То је, у заробљавању материјала за детекцију ових микроорганизама да раде на стругање, али не мождани удар, као у брис Цхламидиа трацхоматис неће бити откривена, чак и ако су у телу у великом броју.

При узимању материјала из урогениталног тракта потребно је избјегавати инхибиторне нечистоће, као што су слуз, крв или гној. Због тога се ракете узимају не пре два сата након мокраће, жене узимају у обзир дане циклуса [1]. Вишак слуз или гној се мора уклонити стерилним памучним тампоном непосредно пре узимања биоматеријала. Узимати материјал пожељно специјалним пластичним сондама, што смањује вјероватноћу појављивања крви у узорку, осим, ​​за разлику од ватрене вуне, не сорбирају транспортни медиј и материјал за тестирање. [1]

Третман биолошког материјала

Правилна урогенитални узимање гвозде - поступак болно за мушкарце и децу, тако да студија може користити прву део јутарњег урина садржи максималан број епителних [1] У наредним, јер је потребно да се добије ћелијски пелет урина. Међутим, преципитат садржи велику количину соли и уреје, који, када се користе флуоресцентне технологије детекције, денатурне сонде, што може довести до лажних позитивних резултата. Према томе, седимент целичне тјелесне силе мора обавезно бити опран физиолошким раствором [4]

Следећа грешка преаналитичке фазе је неправилно руковање крвљу. Да би се спречило крварење крви током испоруке неопходно је користити антикоагуланте. У многим лабораторијама, хепарин се користи као антикоагулант. Међутим, хепарин довољно снажно инхибирају ПЦР и, без обзира на тест систему и поступку за припрему узорка, сви резултати за узорак га садржи, исто не важи уколико неки од унутрашње контроле ПЦР или негативну, без обзира реалног стања, ако унутрашње контроле не [3]

Складиштење биолошког материјала

Грешке аналитичке фазе ПЦР-дијагностике

Грешке у раду

Грешке аналитичке фазе обично су повезане са нечитљивим очитавањем упутстава приложених у комплету за спровођење ПЦР анализе.

Једна од ових грешака је погрешан избор система за припрему узорака. Мање опасна употреба брзих метода за комплексне биоматеријала - као што су, на пример, крвној плазми, јер у овом случају највероватније дати погрешне резултате услед преосталог у инхибитора узорка ПЦР, која, заузврат, ће приморати стручну ЦДЛ поновити експеримент и сазнајте разлог пропусти. Много опасније, уколико због погрешно изабрана тест систем у поступку припреме узорака се губи део или сав ДНК или РНК узрочника - у овом случају, постоји ризик од лажно негативним резултатом.

Друга грешка је неправилно припремљена епрувета за тестне системе за тестне системе са флуоресцентном детекцијом на крају. Најчешће је то због чињенице да запослени у лабораторији заборавља да их промени када се појави нова серија реагенса или то не ради због економичности. Могуће је да ће исте компоненте реакционе смеше тешко имати другачији ниво флуоресценције, међутим, у различитим серијама реагенса, концентрације компоненти могу се разликовати и вероватноћа различитих нивоа флуоресценције је велика. Дакле, грешка, која у неким случајевима може бити занемарена, у другим може дати велики број непоузданих резултата.

Још једна грешка у вези са неправилном припремом позадинских цеви је додавање полимеразе у њима. Ово се може десити или случајно или зато што лабораторијски техничар не разуме потпуно зашто није потребно додати полимеразу. Могу постојати два сценарија: ако тест систем није укључен у унутрашњој контроли или негативне контроле узорка не који су претрпели користи алокацију буффер, а ако тест систем укључује интерне контроле, који је под парафин и / или негативне узорак прође корак избор. У првом случају, додавање полимеразе не може значајно утицати на резултат, али у овом случају постоји ризик од контаминације, како позитивног, тако и унутрашњег. У другом случају, све негативне вредности су непоуздане. Детецт грешка не представља проблем јер су нормализација вредности су веома високи, близу 103, а флуоресценције вредности у неким цевима - знатно мање од 1.

Контаминација

Проблем контаминације се јавља када лабораторија није правилно организована или када су позитивни узорци нетачни. Дакле, када се користи електрофореза гела као метод детекције, простор за његово понашање мора нужно имати посебан улазни и вентилациони систем. У супротном, вероватноћа да ће амплицон из цеви за отварање ући у друге просторије је веома висок. Ово може довести до чињенице да ће током времена све више и више узорака које се тестирају за честе инфекције бити позитивне. У првим фазама оваквог загађења негативна контрола може остати чиста, јер појављивање лажних позитивних резултата је статистичке природе.

У случају флуоресцентне детекције, цеви се не отварају и, теоретски, вероватноћа контаминације је близу нуле, али могућност његовог отварања није искључена. Због тога је боље, ако ће се у посебној просторији извршити појачање и детекција, у случају ванредне ситуације једна соба ће бити загађена.

Још једна грешка која доводи до контаминације узорака повезана је са нетачним руковањем оба клиничка узорка и позитивних контролних узорака и стандарда. Неки лабораторијски стручњаци користе један савет да сачувају велики број епрувета исте супстанце. Ово је нормално ако су цеви празне или је њихов садржај исти (припрема амплификационих цеви). Међутим, ако је цев у узорку, као што је, на пример, у узорку припреми чак приликом исто решење у епрувети повећава ризик разног преноса ДНК између цеви - тзв унакрсне контаминације. Како би се спријечила унакрсна контаминација, препоручује се кориштење савјета са филтерима за убацивање узорака који потенцијално садрже ДНК.

Поред тога, са неугодним радом, постоји ризик увођења инхибитора у узорак (на пример, талка из рукавица).

Грешке у тумачењу резултата

Говорећи о грешкама приликом тумачења резултата, има смисла размишљати о различитим методама детекције.

Када се детекција електрофорезом гела, постоји ризик да се за не-специфичне фрагмената су специфични, ако су слични у дужину и не постоји могућност јасно и недвосмислено упоредите контроем позитивно и, у идеалном случају, са дужинама маркера. Такође, пошто узорак често примењује на гелу са једним врхом, постоји ризик од контаминације у фази откривања, уколико врх се лоше опрана или један од узорака се показала као веома висока концентрација ДНК. Ова врста загађења је лако гусеничари ако бенд је примећено у познатом негативном узорка, међутим, да је не разликује од контаминације у лабораторији и захтева преиспитивање свих узорака.

Једно тумачење грешака повезаних са употребом метода флуоресцентне детекције крајње тачке је непажња вредностима нормализацију позадинских епруветама и флуоресценције вредности у негативне узорцима. Стога, када правилно ускладиштена у позадини сонде цеви пуцају, а нормализација вредности значајно повећала у периоду од од неколико сати до неколико дана, са вредностима флуоресценција узорака су у већој или мањој мери потцењена. Главни критеријум за поузданост добијених резултата у овом случају може бити негативан узорак. У одсуству неслагања између позадинске и амплификацијске епрувете, негативни узорци имају вредности флуоресценције близу јединства или, у ретким случајевима, нешто веће. Ако су вредности флуоресцентне у једном или више негативних контролних узорака, односно знатно мање од јединства, са великом вероватноћом може тврдити да не се цеви не подударају позадину ове студије, у овом случају потребно је да их промени.

Поред горњем примеру, може се десити да Позадинска флуоресценција повећава амплификације цеви док су епруветама у Позадинска флуоресценција остаје непромењена. Ова ситуација може се десити када се цеви за појачање складиште на собној температури. У овом случају, садржај позитивних резултата са ниским вредностима флуоресценције ће се повећати. Резултати до научити као када контаминација у лабораторији, али у овом случају све ниске вредности флуоресценције су приближно једнаке, што контаминација случај веома ретка, јер је мало вероватно да ће једнака количина страног материјала добили све негативне цеви. Таква лако избећи ако промените позадини цеви једном месечно и по, у овом случају, као по правилу, нема времена да се појави прилично велику разлику између готове позадине и појачавања цеви.

Грешке пост-анализе фазе ПЦР-дијагностике

Грешке у завршној, постаналитицал фаза, које се тичу погрешног тумачења лекара ПЦР-анализа резултата због заблуде о средство или метода могућностима заразне.

На пример, контролна студија о кламидији 1 недеља након завршетка курса антибиотика дала ће позитиван резултат. Доктор ће закључити да је терапија неефикасна. Међутим, крајњи резултат може бити најраније 4-6 недеља након епителни слој замењен који паразитира микроорганизма [1] Рани дијагноза може показати нетачне резултате, јер епителне ћелије трају мртве микроорганизме.

У случају обрнутог истраживачког могуће "имунолошког отисак" - преосталог нивоа антитела, које код неких људи може потрајати месецима или чак годинама након опоравка, или ПЦР се не сматра специфичним врстама тест системе.

Шта је ПЦР? Лажно позитиван резултат ПЦР

Дијагноза заснована на ланчаној реакцији полимеразе, појавила се прије 30 година захваљујући истраживању америчког научника Царрие Муллеса. Метода је постала широко распрострањена и постала је пробој у микробиолошким истраживањима.

Генерално, техника предложена од стране Муллеса омогућава клонирање гена. Суштина микробиолошког дијагностичког алата идентификованог као резултат истраживања је следећа. Међу огромним количинама информација о гену, постало је могуће наћи одређени микро-сите са жељеним ДНК кодом. Овај фрагмент, користећи природну способност ДНК да се реплицира (множи), затим се више пута клонира.

Цео процес се одвија у епрувети. Репродукција узорка се изводи помоћу ензима полимеразе. Два узорка узета за одређени дио ДНК, чине решење у потрази за комплементарним подручјима и придружују се њима. Формира се полазна тачка, која се онда копира. То је оно што је ПЦР.

Природна репродукција ДНК стално се јавља у било ком живом организму. Релативно млада дијагностичка метода, описана изнад, вам омогућава да управљате овим процесом. А ефекат није на цијелом молекулу, већ само на одређеном дијелу нуклеинске киселине (ДНК). Реакција се понавља, повећавајући фрагментиране дијелове ДНК у геометријској прогресији, па се реакција назива ланчана реакција.

Да би се започела процес ланчане реакције, ванземаљски елемент мора бити присутан у биосфери која се анализира, иначе неће бити реакције.

Апликације

Дијагностичке студије засноване на ПРЦ-у успешно се користе, првенствено у медицини. Ова метода омогућава идентификацију ћелија инфицираних вирусом и генетских болести. Пулмонолози имају прилику да идентификују вирусне типове пнеумоније и туберкулозе. У пракси гинекологију и уролог је могуће извршити студије утврдити болести које су раније неоткривен пацијената дуги низ година, на пример, уреапласмосис и кламидија. Тренутно се метода ланчане реакције полимеразе користи за дијагнозу заразних болести у готово свим областима медицине.

Неопходан је за слична истраживања и форензичке науке. Према ДНК анализи, узети из биолошког материјала, који остаје на месту злочина, стручњаци могу утврдити учешће одређених појединаца. Случајеви када учинилац не оставља траг, бришући отиске прстију, већ дуго постају историја.

Чак и без сусрета с појмом ПЦР, оно што није познато, многи су могли да искусе предности овог начина дијагнозе. Такве студије су у стању да идентификују патогене са једном ћелијом, што је изван моћи других имунолошких и бактеријских метода дијагнозе. Реакција траје само неколико сати, што вам омогућава да производите резултат током радног дана.

Грешке у резултатима истраживања

Током свакодневног рада лабораторије добија се велики број ДНК материјала у епруветама. Кршење процеса истраживања биоматеријала може довести до лажно-позитивног или лажно-негативног дијагностичког резултата. Кршење правила барем у једној од фаза ланчане реакције може довести до лажног резултата.

Доктор, приликом узимања биоматеријала, треба пажљиво обављати своје дужности. У размазима или грудвама, не треба бити страних елемената, на примјер, крвних зрнаца. Истовремено, за потпуну студију неопходно је имати довољно епитијелних ћелија у материјалу, а неосновано сакупљени материјал садржи велики проценат неинформативне слузи.

У великој мјери, на лажно позитиван резултат ПЦГ-а утјече начин транспорта и складиштења заражених ДНК ћелија. Због кршења технолошких захтјева за процес вођења свих фаза студије, заражени материјал може доћи до уништења или промјене његове структуре, што ће довести до немогућности спровођења реакције.

Као и сви остали лабораторијски тестови, ланчана реакција полимеразе захтева одговарајући третман свих употребљених инструмената. Лабораторија и особље морају посматрати стерилност у свим фазама дијагностичких тестова. Непоштовање санитарних норми може довести до откривања екстерне инфекције, односно лажно позитивног резултата испитивања.

Коришћени реагенс су од великог значаја за квалитет обављеног рада. За дијагнозу полимеразном ланчаном реакцијом, ДНА се поставља у раствор нуклеотида. Све супстанце морају бити корисне. Смањење процеса доводи до смањења нивоа његове ефикасности.

Дијагностички метод заснован на ПЦР-у даје 100% резултат. Али због чињенице да су коришћени материјали веома осетљиви на различите факторе, само квалификована лабораторија може дати апсолутно тачан резултат.

Резултати ПЦР анализа

ПЦР-истраживања су дуго укључена у низ лабораторијско-дијагностичких студија различитих болести.

Већ неколико деценија развоја и побољшања техника је постала неопходна за дерматовенереологију.

У овом чланку ћете научити

Које су ПЦР студије и њихови резултати.

Полимеразна ланчана реакција - Ово је метод дијагнозе, који омогућава идентификацију узрочника болести.

Јединствени низ генетичког материјала који је присутан у микробиолошкој ћелији једне врсте или сој патогених микроорганизама служи као потребни фактор.

Најчешће је циљ студије ДНА бактерије или вируса, али ПЦР метода даје резултате за РНА микроорганизама.

Зашто користити разне биолошке материјале:

  • пљувачка
  • биопсија ткива
  • урина
  • цереброспинална течност
  • крв
  • ожиљци из слузокоже

Резултати ПЦР дијагностике су

подаци о присуству или одсуству болести су најједноставније, доступне информације.

Постоје методе ПЦР, чији резултати, поред утврђивања чињеница инфекције, омогућавају вам да процените активност инфекције, динамику болести и одговор на текућу терапију.

Ова опција се зове "полимеразна ланчана реакција у реалном времену", која се најчешће користи за пацијенте са хроничним вирусним инфекцијама крви - хепатитис, ХИВ.

Главна предност технике - највећа осетљивост и специфичност.

Такве анализе се брзо спроводе и врло прецизне.

Представљањем поузданих података, можете започети лечење што је раније могуће.

ПЦР студија се састоји од три фазе:

  • Припрема узорка након узимања материјала.
  • Сама реакција полимеразе, која се састоји у поновљеном копирању фрагмената материјала.
  • Тумачење резултата.

Резултати теста ПЦР-а су позитивни ако се открије сумњиви патоген.

Ако не, резултат негативно.

Као такав, не постоји одобрен образац тестног резултата.

Ово је због чињенице да истраживање и фиксирање података врши рачунар.

Сходно томе, графикони и подаци у обрасцу се уносе на начин прописан софтвером под којим уређај ради.

Према томе, тумачење резултата испитивања захтева посебну обуку и искуство од лекара.

У случају када се реакција ланца полимеразе одвија у реалном времену, број откривених копија генетског материјала жељеног микроорганизма се посебно приказује у резултатима теста.

Наравно, ако се оне откривају у принципу.

Позитивни резултат

Сви агенти за сексуално преносивим болестима и блоодборне инфекција (хепатитис, ХИВ), једном у људском телу почињу да се умножавају, али не се манифестује.

Постоји тзв. Инкубацијски период или торпидни, латентни ток инфекције.

У таквим случајевима, ПЦР и даље налази генетске маркере патогена у дијагностичком материјалу у року од неколико дана од тренутка инфекције.

Да би анализа постала позитивна, један ДНК или РНА молекул патогеног микроорганизма је довољан у сакупљеном дијагностичком материјалу.

За многе ране уређаје постоји технолошки праг осетљивости од 40 микробиолошких тела.

Али, као по правилу, ако особа буде заражена једном или другом полно преносивих болести, или СТД, онда је патогена у узорцима је већи од овог броја, а анализа ће бити позитиван.

Негативни резултат

Углавном, ова опција је могућа у два случаја: особа није заражена или дијагностички материјал није правилно прикупљен.

Наравно, не може се искључити да концентрација патогена у тестном узорку може бити нижа од прага осетљивости уређаја.

Али таква ситуација је изузетно ретка, и ако лекар има сумње, онда се анализа увек може поновити после неког времена.

Ако резултати ПЦР дијагнозе остају негативни, онда је особа здрава.

У супротном, када добијете друге позитивне тестове, то значи да је пацијент заражен и да је неопходно започети његов третман.

Дешифровати резултате ПЦР анализе треба да присуствује лекару

Дешифрујте резултате анализе ПЦР од стране лекара који је присутан, који познаје терапију.

Идеално би требало да буде исти специјалиста који сакупља дијагностички материјал за студију, може посматрати пацијента и пратити све промјене у људском здрављу.

Нажалост, клинички ток модерних венеричних болести и инфекција веома се разликује од класичног.

У таквим случајевима, чак и резултати ПЦР анализе морају бити подржани подацима из других студија:

  • микроскопија мрље секреције гениталије, из уретре
  • серолошке реакције крви на антитела одређеним патогенима (ЕЛИСА, РПГА и други)
  • култура културе

Ситуације када се подаци различитих метода супротстављају једни другима, на срећу, нису често испуњени. На пример - ПЦР је позитиван, а ЕЛИСА је позитивна.

Ово се дешава на крају лечења пацијента, када су патогени микроорганизми већ уништени и таквих патогена у људском телу нема.

Али антитела (имуноглобулини) антигеном патогена инфекције и даље циркулишу у крви неколико недеља или чак месеци, године.

Са клиничким опоравком, ово одступање се тумачи у корист ПЦР-а, јер су његови резултати тачнији од студија заснованих на антителима.

Култивација се сматра најосетљивијим, али је потребно неколико дана или чак недеља да добије своје резултате.

Због тога се бактериолошка истраживања спроводе само када ПЦР не може пружити гарантовани тачан одговор.

Важно је да се упореде добијени подаци анализа и клиничких карактеристика тока инфекције.

Дакле, у неким случајевима резултат ПЦР-а је позитиван, иако је узрочник успешно елиминисан имунолошким системом.

Пошто је пацијент управо завршио лечење у свом телу, мртви патогени микроорганизми и даље остану.

Њихов геном ће се наћи, али још увек позитиван резултат не значи присуство болести.

Лажни негативни резултат ПЦР анализе је могућ:

  • на погрешном приступу пацијенту
  • узимајући материјал не из жељеног биолошког окружења

Веома је важно темељно тумачење свих детаља и нијанси болести.

Посебну пажњу треба обратити на оно што и како се особа примијенила од почетка првих симптома до тражења квалифициране медицинске његе.

На пример - антибиотици, који се могу купити у било којој апотеци.

Самотретање често доводи до значајног смањења броја микроба због чега може доћи до лажно негативног резултата ПЦР анализе.

То јест, улога особе, доктора, своди се само на правилан начин сакупљање дијагностичког материјала и затим дешифрирање резултата.

Дијагностичке могућности методе

Овај метод лабораторијских истраживања је веома универзалан.

Постоји ПЦР дијагностика:

  • сексуално преносиве инфекције.
  • Такође, неки патогени респираторних болести (пертусис, бронхосептикоза)
  • посебно опасне инфекције (ХИВ), хепатитис
  • узрочници агенских инфекција (ротавирус, салмонела, Хелицобацтер пилори)
  • вируси грипа и други.