Принцип методе: формулација реакције преципитације у капилару. У присуству ЦРП, серум формира преципитат (љуспице, седимент).
Материјал теста: Серум
Припрема тестираног материјала: 0,5 мл крви узима се од улнарне вене, прста или уха, серум је одвојен од стрдка, требало би да буде провидан.
Реагенси: дијагностички серум за ЦРП, добијен од крви животиња након њихове хиперимунизације ЦРП-а.
Ток реакције:
1. Да бисте дијагностички серум бирали у стаклену капилару за 1/3 дузине.
2. Обришите капиларе памучном вуном и спустите је са истим крајем у тестни серум.
3. Прикупити 1/3 дужине тест серума.
4. Мијешајте садржај капиларе са шишком.
5. Потапајте крај капиларе у глине тако да ниво течности у њој износи 10-15 мм изнад површине глина. Реакција се јавља на температури од 12 плус или минус 6 степени.
6. Прелиминарно процените резултат за 4 сата. Коначно - након 20 плус или минус 4 сата висине падавина преципитира у облику талога, љуспице. Преципитација талога у капилару указује на присуство ЦРП у тестном серуму. Количина талога се узима у обзир у целој капилари. Резултат је написан као:
"+" - слабо позитивни (високи тлак 1 мм)
"++" - позитивна (преципитација 2 мм висока)
"+++" - позитивна (преципитација висине од 3 мм)
"++++" - оштро позитивно (преципитирати 4 мм или више).
Одређивање активираног парцијалног тромбопластинског времена (АПТТ)
Принцип методе: одређивање згрушавања времена цитриране тромбоцитима сиромашне плазме додавањем оптималне количине калцијума у смислу стандардизације каолина и цефалина активацију фазе контакта процеса коагулације.
Реагенције: калцијум хлорид 0,025 мол / л, каолин-кефалин мешавина.
Опрема: водени термостат на 37 степени Целзијуса, штоперица, микропипете за 0,1 мл, силиконске цеви.
Напредак у одређивању: тест тубе са 0,1 мл испитиване плазма 0,1 мл кефалиновои-каолина, смеша је снажно мућка и инкубирају 5 минута на 37 степени у воденом купатилу. После 5 минута додајте 0,1 мл претходно загрејаног до 37 степени Целзијуса калцијум хлорида и истовремено укључите штоперицу. Запазите време формирања стрдка, извадите цев из воде сваке 3-5 секунди и мало нагните. Одређивање се врши 2-3 пута и узима се просечан резултат.
Нормалне вредности: 38-55 секунди.
Клинички и дијагностички значај: АПТТВ је тест за проналажење недостатка фактора, јер карактерише процес формирања тромбиназе дуж унутрашњег пута. Продужење АПТТ-а се примећује у присуству инхибитора (хепарина), недостатка фактора коагулације. Скраћивање АПТТ-а указује на хиперкоагулацију (фактор ризика за тромбозу).
Датум подношења: 2015-03-23; погледа: 884; НАЛАЖИТЕ ПИСМО РАДА
У малим здравственим установама које немају свој имунолошки службу у биохемијске лабораторије обавља полу-квантитативно одређивање Ц-реактивног протеина. Име Ц-реактивног протеина је добијено због његове способности да реагује са преципитацијом са Ц-полисахаридним пнеумоцокци. У свом молекулу постоје места слична ИгГ и анафилотоксину И (Ц3а фрагмент компоненте комплемента система Ц3). Иницијална синтеза протеина у хепатоцитима јавља, његове лансирања антигене, имуних комплекса, бактерије, гљивице, повреду (4-6 сата након повреде).
Када упала и некроза ткива нагло синтеза (100-1000 пута) повећава у функцији Ц- реактивног протеина је повезана са активацијом моноцита-макрофага системом, повећање мобилности леукоцита, активацију класичног пута комплемента и имуних реакција. Велики клинички значај теста (у квантитативној анализи) пружа масовну и брзу (6-12 х) повећање концентрације протеина и кратак полуживот.
Са интеракцијом Ц-реактивног протеина у серуму теста са специфичним антисерумом, формирају се преципитати.
Ц-реактивни протеин (ЦРП, Ц-реактивни протеин - ЦРП) је прилично стари лабораторијски тест који, као и ЕСР, показује да је тело акутни инфламаторни процес. Конвенционалне методе ЦРП не могу се открити, у биокемијској анализи крви, повећање његове концентрације се манифестује повећањем α-глобулина, који заједно са осталим протеином из акутне фазе представља.
Главни разлог за појаву и повећање концентрације Ц-реактивног протеина су акутна инфламаторна обољења, која дају вишеструку (до 100 пута) повећање овог протеина са акутном фазом већ за 6 - 12 сати од почетка процеса.
ЦРП у крви и одвојен протеин молекул
Поред високе осетљивости ЦРП различитих дешавају догађаја у телу, промене на боље или на горе, она добро реагује на интервенција лечења, тако да се може користити за праћење ток и лечење различитих патолошких стања, у пратњи пораста овог индикатора. Све ово објашњава велико интересовање клиничара са којима је овај протеин са акутном фазом назван "златни маркер" и означен је као централна компонента акутне фазе запаљеног процеса. Истовремено, откривање ЦРП-а у крви пацијента крајем прошлог века било је извесно тешкоће.
Детекција нивоа Ц- реактивног протеина готово до краја прошлог века била проблематична, јер ЦРП није дала на конвенционалне лабораторијским тестовима, крвна састојака. Семи-квантитативна метода колтсепретсипитатсии у капиларима коришћењем антисерума је веома квалитетна, као што је изражено у "плус" у зависности од износа (у милиметрима) од издвојених љуспица (талога). Највећи недостатак анализе је време које је потрошено на добијање резултата - Одговор је био само дан касније и могао је имати следеће значење:
Наравно, чекајући тако важну анализу од 24 сата било је изузетно непријатно, јер се један дан могао променити у пацијентовом стању и често не на боље, тако да су се лекари често морали ослањати првенствено на ЕСР. Стопа седиментације еритроцита, која је такође неспецифични индикатор упале, за разлику од ЦРП, одређена је по сату.
Тренутно је описани лабораторијски критеријум вреднован изнад ЕСР и леукоцита - показатељи општег крвног теста. Ц-реактивни протеин, ЕСР пораст појављивања пред нестане чим повуку или процес третман ће имати утицај (у 1 - 1,5 недеља), док ће седиментација еритроцита бити изнад нормалних вредности и до месец дана.
Ц-реактивни протеин припада веома важним дијагностичким критеријумима, тако да развој нових метода за његово одређивање никад није отишао у позадину, а сада тестови који откривају ЦРП престали су да буду проблем.
Није укључен у биокемијску анализу крви, Ц-реактивни протеин се лако одређује помоћу комплета латекса на бази латекс аглутинације (квалитативна и полквантитативна анализа). Захваљујући овој технику, пола сата неће проћи, јер ће одговор који је толико важан за доктора бити спреман. Такво брзо истраживање је добро успостављен, као почетна фаза дијагностичке потрази акутних стања, поступак добро корелира са турбидиметриц и нефелометријских методама, тако да је погодан не само за скрининг, већ и за коначне одлуке о дијагностици и избору лечења.
Концентрација овог лабораторијског индикатора препознаје се уз помоћ турбидиметрије високог осетљивости са побољшањем латекса, ензимским имуноассаиом (ЕЛИСА) и методима радиоимуноассаиа.
Треба напоменути да се врло често користи описани критеријум дијагноза патолошких стања кардиоваскуларног система, где ЦРП помаже идентификацију могућих ризика од компликација, прати напредак процеса и ефикасност предузетих мера. Познато је да ЦРП сам учествује у формирању атеросклерозе чак и при релативно ниским вриједностима индикатора (на питање, како се то дешава, вратит ћемо се). Да би се решили такви проблеми, традиционалне методе лабораторијске дијагнозе кардиолога не задовољавају, па се у овим случајевима користи високотрецна мјерења хсЦРП у комбинацији са липидним спектром.
Поред тога, ова анализа се користи за израчунавање ризика од развоја кардиоваскуларне патологије код дијабетес мелитуса, обољења екскретионог система, неповољне трудноће.
У крви здравих особа, ниво ЦРП је веома низак или је тај протеин потпуно одсутан (у лабораторијском истраживању, али то не значи да то уопште није случај - само тест не ухвати неуједначене количине).
За норму прихваћене су следеће границе вриједности, осим тога, не зависе од старосне доби и пола: код деце, мушкараца и жена, то је један - до 5 мг / л, изузетак је само Новорођена дјеца - дозвољено је да имају до 15 мг / л овај протеин акутне фазе (што потврђује референтна литература). Међутим, ситуација се мења са сумњом на сепсу: Неонатологе бегин хитну акцију (антибиотике) са порастом ЦРП код детета до 12 мг / л, док су лекари кажу да је бактеријска инфекција у првих неколико дана живота не може обезбедити нагли пораст у овом протеина.
Лабораторијски тест се врши за идентификацију протеина Ц-реактива у случају многих патолошких стања уз праћење инфламације изазване инфекцијом или уништавањем нормалне структуре (уништавање) ткива:
Да бисмо боље представили дијагностичку вредност ове анализе, неопходно је разумети шта су протеини акутне фазе, да бисте сазнали узроке њиховог појављивања у крви пацијента, детаљније да размотри механизам имунолошких реакција у акутном запаљеном процесу. Оно што ћемо покушати учинити у следећем одељку.
ЦРП и његово везивање на ћелијску мембрану у случају оштећења (нпр. Упале)
ЦРП, који учествују у акутним имунолошких процеса промовисати фагоцитозу у првој фази одговор организма (ћелијски посредован имунитет) и представљају једну од кључних компоненти друге фазе имуног одговора - хуморални имунитет. Ово се дешава на следећи начин:
Стога, повишени ниво ЦРП указује на појаву заразног процеса у најранијој фази његовог развоја, и употреба антибактеријских и антиинфламаторних лекова, напротив, смањује његову концентрацију, што омогућава да овај лабораторијски индикатор дају посебан дијагностички значај, називаћи "златни маркер" клиничке лабораторијске дијагностике.
За особине које осигуравају перформансе бројних функција, Ц-реактивни протеин духовитог истраживача добио је надимак "двоструки Јанус". Надимак се показао успешним за протеин који обавља много задатака у телу. Његова свестраност лежи у улогама да игра у развоју инфламаторне, аутоимуних, некротичних процеса: способност да комуницира са великим бројем лиганада да идентификују стране агенте, благовремено укључују уништење "непријатељских" одбране.
Вероватно је свако од нас икада доживео акутну фазу инфламаторне болести, где је Ц-реактивни протеин у центру. Чак и без знајући све образовне механизме ДРР може да буде независно сумњају да је у процесу укључује цело тело: срце, крвне судове, мозак, ендокриног система (температура расте, "ацхе" тела, главобоља, убрзава откуцаје). Заиста, она сама грозница већ указује на то да је процес започео, а у телу су започеле промене метаболичких процеса у различитим органима и цијелим системима, узрокованим повећањем концентрације маркера акутне фазе, активирањем система имунитета, смањењем пропустљивости васкуларних зидова. Ови догађаји нису видљиви, али се могу одредити помоћу лабораторијских индикатора (ЦРП, ЕСР).
Ц-реактивни протеин ће се повећати већ у првих 6-8 сати од појаве болести, а њене вриједности ће одговарати тежини процеса (тежи курс, што је већи ЦРП). Таква својства ЦРП-а омогућавају да се она користи као индикатор у дебију или током различитих запаљенских и некротичних процеса, што ће разлоге за повећање индикатора:
Повећана ЦРП често се дешава када:
Треба истаћи то Вредности индикатора за различите групе болести могу се значајно разликовати, на примјер:
И више: не желим да уплашим некога, желим да додирнем веома важно питање у вези с повећаном количином ЦРП код здравих људи. Висока концентрација Ц-реактивног протеина са спољашњим потпуним благим бића и одсуство било каквих знакова било које патологије сугерише развој онколошког процеса. Такви пацијенти треба да поднесу детаљно испитивање!
Генерално, у својим својствима и способностима, ЦРП је врло сличан имуноглобулинама: он "зна како да разликује" сопствену ", да се повезује са компонентама бактеријске ћелије, са лигандима система комплемента, нуклеарних антигена. Али до данас постоје две врсте Ц-реактивних протеина и како се оне разликују једни од других, додајући нове функције Ц-реактивном протеину, може показати илустративни примјер:
Одговор на упалног процеса драматично повећава концентрацију ЦРП, који је праћен побољшана прелазном пентамерних облику Ц-реактивног протеина у мономер - потребно да индукује реверзну (анти-запаљенски) процес. Повишени нивои НИСС доводи до продукције инфламаторних медијатора (цитокина), неутрофила пријањају за васкуларног зида, уз ослобађање ендотелијалних фактора активације проузрокују спазам, мицротхромби формирање и ометање протока крви у микроваскулатури, тј, формирања артеријског атеросклерозе.
Ово треба узети у обзир код латентног тока хроничних болести уз благо повећање нивоа ЦРП (до 10-15 мг / л). Особа се и даље сматра здравом, а процес полако развија, што може довести до атеросклерозе, а затим до инфаркта миокарда (прве) или других тромбоемболијских компликација. Можете ли замислити колико пацијент ризикује, имајући у тесту крви Ц-реактивни протеин у повишеним концентрацијама, преваленцу фракције липопротеина ниске густине у липидном спектру и високим вриједностима атерогеног коефицијента (ЦА)?
Да бисте избегли несрећне последице, пацијенти са високим ризиком, не треба заборавити да предузму неопходне тестове за себе, и ЦРП су измерили високо осетљивим методама, а ЛДЛ холестерола у спектру липида је студирао са очекивање атерогене фактора.
Можда читалац није примила одговоре на сва њихова питања о централном компонента акутној фази - Ц- реактивног протеина. С обзиром да су комплексне имунолошких одговора стимулације, регулација синтезе ЦРП и његове интеракције са другим чиниоцима имунитета су вероватно неће бити заинтересовани за лично, далеко од ових научних и разумљивим терминима у тексту, нагласак је стављен на особинама и важној улози акутне протеина фазе у пракси медицине.
А значај ЦРП-а је стварно тешко прецијенити: је неопходно за спровођење контроле над током болести и делотворности терапијских мера, као и дијагностици акутних инфламаторних стања и некротичних процесима, где испољава високу специфичност. Међутим, он, као и остали акутне фазе протеина, необичних и неспецифичног (разних разлога за повећање ЦРП, свестраност Ц-реактивног протеина на рачун способности да комуницира са бројним лиганада) који не дозвољава коришћењем овог индекса за разликовање различитих стања и да се успостави тачна дијагноза ( ни због чега се звао "двоструки Јанус"?). И овде је, чини се, да учествује у формирању атеросклерозе...
Са друге стране - у дијагностичкој претрази укључено је много лабораторијских студија и инструменталних дијагностичких метода које ће помоћи ЦРП-у, а болест ће бити успостављена.
МД Балабин, Кандидат медицинских наука
В. В. Слеписхева, Кандидат медицинских наука
А. В. Козлов, доктор медицинских наука
Санкт Петербургска медицинска академија постдипломског образовања
Преглед представља анализу литературе о методама за одређивање Ц-реактивног протеина. Резултати изведених истраживања популације омогућили су поновну процјену нормативних вриједности концентрације Ц-реактивног протеина када је то одређено високо осетљивом методом.
Ц-реактивни протеин (Ц-РБ) је први пут откривен 1930. године у серуму крви пацијената са пнеумококном пнеумонијом [1]. Касније је било приметно да је у присуству калцијумових јона овај протеин у стању да формира комплексе са Ц-полисахаридна компонента пнеумококалне мембране у облику флокулата. Сам назив "Ц-реактивни протеин"Протеин је изведен из суштине ове реакције [2].
Ц-РБ синтетишу хепатоцита у облику протеина са релативне молекулске масе 118 кДа, који се састоји од пет идентичних подјединица које формирају циклични пентамера. Главни фактори стимулишу његову синтезу су интерлеукин 6 (ИЛ-6) и ИЛ-1п, фактор некрозе тумора-а (ТНФ-α), интерферон-и, трансформишући фактор раста-п [3].
Главне функције Ц-РБ није у потпуности разјашњен. Утврђено је да се везује за бактерије и мембране ткива и убрзава фагоцитозу. Поред тога, акција Ц-РБ има за циљ активирање система комплемента [4]. Одређивање концентрације Ц-РБ у крви у лабораторијској пракси почела је 1940-их. У наредној деценији, дефиниција Ц-РБ је постао један од најпопуларнијих клиничких лабораторијских испитивања за процену стања пацијената са различитим инфламаторним обољењима [5].
Предности Ц-РБ као маркер разних болести су следећи:
1. Има извесну предност у поређењу са ЕСР, јер на количину ЕСР утичу многи фактори у преаналитичкој и аналитичкој фази.
2. Стопа синтезе може да се повећа за 1000 или више пута.
3. Значајно повећање концентрације може се открити 6-10 сати након појаве болести, нормализација нивоа се јавља довољно брзо.
4. Резултати одређивања концентрације Ц-РБ у крви не утиче на лекове, анемију и хипопротеинемију.
5. Концентрација Ц-РБ у крви расте раније него титар антитела и ЕСР, смањује се брже у поређењу са ЕСР.
6. Једноставност имплементације, могућност добијања одговора за неколико минута.
Различити стимуланси, укључујући вирусну и бактеријску инфекцију, тешке трауме, оштећења ткива (инфаркт миокарда, хирургија), хроничне инфламаторне болести, аутоимуних процеса (реуматоидни артритис, системски лупус еритематозус) одбацивање органа после трансплантације, рак, може довести до значајног повећања концентрације Ц-РБ у крви [6].
Као одговор на стимулацију, концентрацију Ц-РБ у серуму крви значајно расте у року од једног сата, удвостручавајући се сваких 5-8 сати [5]. Полувреме Ц-РБ је око 12-24 сата [7]. Узимајући у обзир да повећање концентрације у крвној плазми већине других протеина акутне фазе може бити 10 пута, концентрација Ц-РБ се може повећати за 100-1000 пута у односу на норму. Концентрација Ц-Блоод РБ у тзв. Клиничком интервалу (изнад 10 мг / л) поуздано указује на присуство запаљеног процеса. Повећајте садржај Ц-РБ у акутној фази упале је много израженији у поређењу са другим "протеином акутне фазе": α1-анти-цхимотрипсин, α1-антитрипсин, α1-киселог гликопротеина, хаптоглобина, фибриногена. Са сепом, ниво Ц-РБ се може повећати у поређењу са нормом за 100 пута или више. У року од 2-3 недеље након акутне инфекције, концентрација Ц-РБ се враћа на оригинални ниво [8].
Од посебног интереса у овом тренутку је приступ тумачењу дијагностичког значаја повећања концентрације Ц-РБ у крви у интервалу "субклиничких" вредности, тј. До 10 мг / л. Пример је дефиниција концентрације Ц-РБ у крви као маркер акутног хипоксичног оштећења миокарда у ИХД [9]. Испоставило се да код пацијената са нестабилном ангином и високим нивоима Ц-РБ у прогнози крви је био гори [10, 11].
Методе за одређивање концентрације Ц-реактивног протеина у крви
Ране методе за одређивање концентрације Ц-РБ у крви су полукуантитативни. Они су базирани на депозицији или аглутинацији делова латекса под утицајем Ц-реактивног протеина. Његову концентрацију у анализираном материјалу процењена је по природи агрегата формираних у реакцији, која су процењивана на скали од +1 до +4. Ове методе нису имале довољно сензитивности и специфичности, што је отежавало корелацију концентрације Ц-РБ са тежином болести. С тим у вези, умјесто Ц-РБ као маркер активности запаљеног процеса одређивали су други протеини "акутне" фазе и брзина седиментације еритроцита (ЕСР).
Касније, за одређивање концентрације Ц-РБ почели да примењују латекс аглутинације реакцију применом специфичних антитела. Мада поступак и односи се на категорију полу-квантитативног, пошто реакција резултате оцењује визуелним прегледом, и има високу осетљивост, наставља да буде широко до сада [12] усед.
Крајем 1970-их. употреба методе афинитетне хроматографије која је омогућена за добијање антитела која су коришћена за високо осетљиве квантитативне методе одређивања концентрације Ц-РБ у крви, укључујући непелометрију, турбидиметрију и различитим варијантама имунохемијске анализе [13]. Широко дистрибуирани развијени у 1980-90-тих година. методе за детекцију концентрације Ц-РБ у крви на нивоу од 3-5 мг / л. Једна од најпопуларнијих квантитативних лабораторијских метода тренутно је имунонеферометрија. Метода има високу осетљивост (0,4 мг / л), потпуно је аутоматизована и омогућава добијање резултата скоро одмах [14].
Другим подједнако популарним методама за одређивање концентрације Ц-РБ у крвном серуму односи се на имунотурбидиметрију. Резултати добијени овим методама корелирају добро са резултатима других квантитативних метода [15, 16]. Да се квантификује концентрација Ц-РБ наставља да користи методу имунофлуоресценције. Ова метода је потпуно аутоматизована, има довољну осјетљивост и специфичност.
Према колеџу америчких патолога (ЦАП), 2001. године за квантификацију Ц-Крв РБ у америчким лабораторијама користе: хемилуминисценцијаје (5%), имунокемијска аналисис (13%), латекс аглутинације (25%), непхелометри (19%) и турбидиметар (38%) [40].
Са становишта осетљивости, методе за одређивање концентрације Ц-РБ се може поделити у две групе. Прва група укључује методе које омогућавају одређивање концентрације Ц-РБ у опсегу од 3 до 20 мг / л. Овај интервал вам омогућава да покријете флуктуације нивоа Ц-РБ код пацијената са акутним заразним болестима.
Да би се решили други проблеми, потребне су методе са много већом осјетљивошћу, што је омогућило да се детектује нижа концентрација Ц-РБ.
Произвођачи су одговорили на овај изазов са ослобађањем високо осетљивих или "ултразвучних" метода одређивања концентрације Ц-РБ (хсЦРП, или ХФЦ-РБ). Границе нижих осетљивости за већину испитних система варирају од 0,05 до 0,20 мг / л. Повећана осетљивост метода детекције Ц-РБ је постигнут коришћењем латексних микрочестица са моноклонским антителима адсорбована на њиховој површини на човека Ц-реактивни протеин. Додавање узорка тестног серума који садржи Ц-РБ, до суспензије микрочестица доводи до формирања комплексно организоване просторне структуре. Количина расејивања светлости или апсорпције светлости квантификује помоћу одговарајућих анализатора. Ова технолошка метода названа је "армирање латекса" (Латек побољшана турбидиметрија). Тренутно, израда тестних система намијењених за квантитативно одређивање концентрације Ц-РБ. Конкретно, када се користи неболометар "БН ИИ Даде / Бехринг", просечне вредности концентрације Ц-РБ у крви здравих људи у 90% случајева не прелази 1,69 мг / л, у 95% - 2,87 мг / л. Коефицијент варијације (ЦВ) је 3,1% у концентрацији Ц-РБ 0,5 мг / Л и 5,7% у концентрацији од 56 мг / Л [16].
Таква висока резолуција метода за одређивање концентрације Ц-РБ у крви служи као основа за проучавање улоге хроничног запаљеног процеса код атеросклерозе [16]. Употреба високо осетљивог метода омогућава процену ризика од развоја инфаркта миокарда код пацијената са акутним коронарним синдромом.
У изведеним студијама показано је да је концентрација Ц-РБ у опште прихваћеном "нормалном опсегу" је независни прогностички фактор ризика за развој коронарних догађаја у будућности [17, 18]. Алгоритми за процену ризика базирани на Ц-РБ и други маркери [19, 20]. Пошто већина пацијената у овој категорији има концентрацију Ц-РБ у крви је унутар референтних вредности, методе које се користе морају омогућити тачно мерење концентрације Ц-реактивни протеин у опсегу од 0,15 до 10 мг / л [21].
Ова методологија обезбеђује метод такве високе осетљивости што омогућава раздвајање различитих група унутар општеприхваћених граница норме. Ово дозвољава Ц-РБ као маркер у епидемиолошким и научним истраживањима и рангирање група пацијената према ризику од појаве васкуларних компликација у ИХД [3].
Тренутно нема универзалног референтног материјала и нема референтне методе за одређивање концентрације Ц-РБ је у крви. Разлог за разлике у резултатима добијеним помоћу различитих тестних система је материјал који се користи као калибратор. У том смислу, сваки произвођач тест система покушава да успостави своје референтне вредности у поступку. Истовремено, постоје препознати узорци за одређивање концентрације Ц-РБ: 1) референтни узорак Ц-реактивни протеин (85/506), која се примјењује 1986. године и одобрена од стране стручњака СЗО; 2) сертификовани референтни материјал 470 (ЦРМ 470), доступан је од 1993-94.
Референтни материјал - РППХС (Припрема за протеине у хуманом серуму). Концентрација Ц-РБ у узорку 470 одговара узорку 85/506.
Метода радијалне имунодифузије (РИД) је јефтина и релативно једноставна, али није погодна за ситуације у којима су потребне брзе анализе. Радиоимуноассаи (РИА) може открити ниске количине Ц-РБ - 1-5 нг / мл. Упркос високој осетљивости, више се није користило због доступности других аутоматизованих метода.
Појава специфичних антитела у Ц-РБ је довела до развоја полквантитативних метода латекса. Резултати добијени овим методом добро су упоредиви са резултатима квантитативних метода. Развој високо осетљивих метода за одређивање Ц-РБ и његово разматрање као прогностички маркер довели су до оштрог интензитета интересовања за овај протеин. У већини метода високе осетљивости, феномен побољшања латекса се користи за повећање осетљивости.
Приликом избора методе, с клиничарима треба да се договори да треба користити одређену методологију, посебно полквантитативну или квантитативну варијанту. Ако су потребни брзи резултати, неопходни су анализатори високих перформанси. Међутим, ако је оптерећење мало и резултат мора бити бржи, аглутинација латекса може бити начин избора.
Разлике у резултатима одређивања концентрације Ц-РБ у серуму у поређењу са плазом добијеним коришћењем ЕДТА или цитрата. У серуму су вредности веће него у плазми, за 8-16% [22, 23]. Није било ефекта уноса хране на концентрацију Ц-РБ у крви [24]. Концентрација Ц-Серум РБ не мења у року од 1 недеље када се складишти на 4 ° Ц или на дужи период, на -70 ° Ц. У случају цхилоус серума пацијента (хипертриглицеридемија од 16 г / л) дефиниција треба одложити. Истовремено хемолиза (хемоглобина и 10 мг / л), хипербилирубинемији (до 600 мг / л) нису препрека, јер не утичу на тачност резултата. Поновљено одмрзавање / замрзавање тестних узорака треба избегавати због могуће дисоцијације пентамера Ц-РБ на подјединице или међупроизводе, као што су тримери.
Пре свега, дијагностичка вриједност се одређује концентрацијом Ц-РБ у серуму крви и цереброспиналној течности (ЦСФ). Овај протеин се такође налази у синовијалној, амниотској, плеуралној, асцитној течности и садржају блистера [22]. Ц-РБ не може продрети у плацентну мембрану. С тим у вези, повећање концентрације код новорођенчади указује на потребу да се овај индикатор проучи како би се идентификовала могућа бактеријска инфекција [25].
Од утврђивања концентрације Ц-РБ и серум, ау ЦСФ има дијагностичку вредност, треба узети у обзир могућност апсорпције Ц-РБ у ЦСФ, што може довести до погрешног потцјењивања резултата [26].
Рхеуматоидни фактор у високом титеру може ометати имунохемијске методе одређивања концентрације Ц-РБ. Већина произвођача тестних система укључује дитиотреитол за њихово уништавање реуматоидног фактора смањујући број дисулфидних веза. Од концентрације Ц-РБ може оштро порасти уз упале, а ниво може бити већи од 1000 пута. То може довести до вишка антигена у реакционом медију. Тзв. Прозонски ефекат је откривен у трећини веома осјетљивогЦ-РБ) [26].
Јело не утиче на концентрацију Ц-ДБ ипак треба размотрити могућност постпрандиалном утицај триглицеридемиа и резултата цхиломицронаемиа иммунотубидиметрии и непхелометри.
Међу факторима који могу утицати на концентрацију Ц-РБ у практично здравој особи, потребно је навести сљедеће [27, 28]:
- пушење;
- Прекомјерна тежина;
- фокална инфекција. Умерена инфламаторна реакција или вирусна инфекција најчешће узрокују повећање концентрације Ц-РБ у опсегу од 50-200 мг / л, виши нивои се могу посматрати код тешке бактеријске инфекције или трауме. Бактеријска контаминација унутрашњег окружења, која се неизбежно јавља уз спору инфекцију, захтева повећану производњу Ц-реактивни протеин - фактор потребан за неутрализацију фрагмената микроорганизама који су ушли у крвоток и међуларни простор. Људи који су икад третирани од стране зубара или необрађених зуба, нашли су повећање концентрације Ц-РБ и фибриноген [29].
- Трудноћа. У каснијим фазама трудноће, концентрација Ц-РБ може повећати [16]. У првим данима живота код новорођенчади физиолошки пораст концентрације Ц-РБ је у крви. Такав физиолошки процес треба разликовати од заразног стања у постнаталном периоду. Висок садржај Ц-РБ у крви пупчане врпце (више од 6 мг / л) је тест за неонаталну инфекцију. Корелације између нивоа Ц-РБ у крви мајке и фетуса није установљена [30].
- Физичка активност. Физичка активност може изазвати и повећану концентрацију Ц-РБ, и његов пад. Екстремно висок терет доводи до повећања концентрације Ц-РБ чак иу практично здравим људима. Међутим, под утицајем редовног физичког напора након одређеног времена, може се посматрати смањење овог индекса. Показано је да чак и благо редовно вежбање има "антиинфламаторни ефекат": доводи до смањења концентрације Ц-РБ и број леукоцита [31].
- Ментални статус. У практично здравим људима који имају психолошке факторе ризика, корелација између концентрације Ц-РБ у крви и индекси скале агресивности [32]. Код особа са прекомерном тежином и депресивним симптомима, пронађено је веза између депресијског расположења и концентрације Ц-РБ, а код особа без гојазности ова веза није пратила [33]. У здравим одраслима, ниво Ц-РБ у серуму је обично испод 10 мг / Л, иако се његова концентрација постепено повећава са годинама. Пошто није развијен примарни метод или референтни калибрациони материјал, резултати утврђивања концентрације Ц-Серум ПБ може бити различит када се користе различити анализатори и тестни системи.
Тренутно, многи клиничари и даље верују да је само концентрација од клиничког значаја Ц-РБ у серуму, премашују одговарајуће референтне вредности, које обухватају:
- испод 8 мг / л - нефелометријска метода;
- 0,2-8,0 мг / л - имунотурбидиметријска метода (ХФЦ-РБ).
Средња дистрибуција концентрације Ц-РБ у крви здравих донора је око 0,8 мг / л; у 90% испитаних узорака Ц-РБ не прелази 3,0 мг / л, у 9% узорака није превазишло 10 мг / л [10]. Најниже концентрације налазе се међу анкетираним здравим волонтерима; бројке незнатно порасле међу донаторима услед скривених запаљенских процеса, повећавају се и са годинама.
Према бројним студијама спроведеним у САД-у и Европи, концентрација Ц-РБ у крви здравих мушкараца и жена није другачија [28].
У крви практично здравих особа Ц-реактивни протеин се детектује у ниским концентрацијама и одражава активност циркулишућих цитокина у плазми. Ц-РБ се налази код здравих људи у концентрацијама мање од 1 мг / л.
Концентрација Ц-РБ у крви се односи на прилично стабилне лабораторијске параметре приликом одређивања изван периода реакције "акутне фазе".
Сматра се да су разлике у концентрацији Ц-РБ блоод, посматрано, чак и унутар референтне вредности плазме у одсуству акутног инфламаторног одговора може бити удружен са комбинованим ефектом низа фактора, пушење, гојазност, гојазност, старост, генетски утврђену базални ниво синтезе, као у присуству малосимптомно инфекције прелазни или хронични [34].
Сезонска или циркадијска варијабилност није карактеристична за Ц-РБ [35,36]. Сезонске варијације у концентрацији Ц-РБ су препознате као безначајне, а откривене промјене се не могу објаснити сезонским инфекцијама.
Повећање концентрације Ц-РБ у плазми крви од становника једног од централних европских градова, повезаних са епизодом загађења ваздуха са сумпорним диоксидом [37].
Једна од методолошких препрека које отежавају процјену концентрације Ц-РБ у популацији је показатељ везе са пушењем. О ефекту пушења на нивоу Ц-Белорусија је позната из ранијих радова, у којима, међутим, овај ризик није директно контактирао са прогнозом. У раду Ј. Т. Данесх ет ал. (2004) на материјалу за будуће студије становништва Реикјавик је показала да људи који постану болесни са коронарном болешћу срца имали значајне разлике у односу на контролну групу са фактором пушења, почетне вредности концентрације Ц-РБ и низ других индикатора [38].
Истовремено, постоје довољни подаци који указују на концентрацију Ц-РБ у серуму одраслих унутар референтних вредности пружа вриједне информације о субклиничким инфламаторним процесима. Верује се да је концентрација Ц-РБ (ХФЦ-РБ) треба узети у обзир заједно са нивоом укупног холестерола и ХДЛ холестерола.
Референтни интервали концентрације Ц-РБ у крви, зависно од старости и пола, приказани су у табели. Концентрација Ц-РБ код новорођенчади је изузетно низак. Повећање њеног нивоа изазваног инфекцијама или другим запаљенским процесима може се открити само употребом високо осјетљивих тестних системаЦ-РБ [39].
Табела. Референтни интервали за концентрацију Ц-РБ у крви
у зависности од пола и старости (мг / л) [15, 42]
Према колеџу америчких патолога (КАП) за 2001. годину, вредност коефицијента варијације (ЦВ, %) приликом одређивања концентрације Ц-РБ се кретао од 50 до 130% са просечном концентрацијом Ц-РБ око 2 мг / л.
ЦЛИА-88 критеријуми за одређивање концентрације захтевају да лабораторије буду у границама од ± 90% од средње групе [40].
Аналитички критеријуми за идентификацију категорије ризика нису утврђени. Сматра се да вредност интрасеријалног коефицијента варијације (ЦВ) у одређивању концентрације Ц-Метода високе осетљивости не би требало да прелази 10% у концентрацији од 0,2 мг / л [41].
Резултати изведених истраживања популације омогућили су поновну процјену нормативних вриједности концентрације Ц-РБ при одређивању високо осјетљивом методом и изван доње границе сиве зоне узима концентрацију од 3,0 мг / л. Дакле, вредност норме Ц-РБ је постала знатно нижа.
Када се разматра степен ризика од кардиоваскуларних болести у категорију ниског ризика, препоручује се упућивање случајева вредности концентрације у плазми ХФЦ-РБ мање од 1,0 мг / л; просјечна вриједност ризика треба препознати у концентрацији у распону од 1,0-3,0 мг / л; Препоручује се да висок ризик од кардиоваскуларних болести буде повезан са вредностима изнад 3,0 мг / л [43].
Ц-реактивни протеин у тестовима крви доктор често гледа заједно са ЕСР-ом да би се утврдила могућност запаљеног процеса у организму у акутној фази. Анализа присуства Ц-реактивног протеина у крви почела је да се користи већ у 1930-тим. Посебна карактеристика овог протеина је брзи одговор на појаву болести. Ниво се повећава већ у року од 6 до 12 сати након појаве болести, када још увијек нема симптома.
"Златни маркер" - тзв. Ц-реактивни протеини клиничари због своје способности да идентификују акутну фазу запаљеног процеса. На задовољство истих клиничара, резултати анализа сада се могу добити за пола сата (у неким случајевима за сат времена) умјесто дана у вези са увођењем савремених техника. При таквој брзини обраде анализе крви осим дијагностике болести могуће је и надгледати процес лечења.
Синтеза Ц-реактивног протеина активира се развојем запаљеног процеса било које локализације у људском телу. Главни механизам дејства овог маркера је реакција преципитације са Ц-полисахаридом пнеумококса и других бактерија, гљивица већ у најранијим фазама патолошког стања.
Главне карактеристике ДРР су:
У савременој медицинској литератури приказани су подаци да постоје два типа Ц-реактивног протеина:
Антигени мономерног протеина су на површини лимфоцита и плазма ћелија, ћелија убица. Уз акутни развој инфламације, уобичајени Ц-реактивни протеин се претвара у мономерну, која већ има све инхерентне ефекте ЦРП-а.
Пошто је овај маркер укључен у комплекс акутних параметара акутне фазе запаљења, карактерише се следећим функцијама:
Треба напоменути да крвни тест у сврху утврђивања ЦРП није обавезан за све. Овај тест се обавља за неке индикације.
Што се тиче сваког маркера, ЦРП карактеришу њихова властита стања у којима је потребно истраживање:
Приликом процењивања добијених података, потребно је надоградити вриједности норме за различите категорије особа.
Код здраве одрасле особе, Ц-реактивни протеин у крви није откривен у анализи биохемијске анализе крви или његова вриједност не сме бити већа од 5-10 мг / л (према различитим подацима).
За правилно интерпретирање примљених података потребно је размотрити следеће факторе:
Поред узимања у обзир нормалне тестне цифре, потребно је узети у обзир и неке факторе који могу утицати на податке анализе.
Пошто је Ц-реактивни протеин индикатор акутне фазе запаљења и патолошких поремећаја у организму, неопходно је идентификовати извор који је изазвао промјену нивоа тестова.
Фактори који доводе до повећања параметара акутне фазе у крви су многи. Што је акутнија болест, већи ће бити показатељи који одражавају озбиљност стања пацијента.
Најчешћи разлози за повећање индекса ЦРП су:
За сваки од ових стања, реакција организма у различитом степену се одвија у облику повећања нивоа Ц-реактивног протеина у крви у различитим степенима. Озбиљност стања треба проценити на основу општеприхваћених параметара евалуације.
Истраживање ЦРП индекса у кардиологији одређује:
Чак иу здраву особу са предиспозицијом на срце и васкуларну болест са дефиницијом реактивног протеина, може се направити прогноза за даљи развој или недостатак истих:
Већ са развојем срчаног удара, нивои Ц-реактивног протеина смањују се за 18 до 20 дана. 40 до 45 дана у одсуству компликација, индикатори су нормализовани. А у случају продуженог и упорног пораста, ова појава се сматра изузетно неповољном.